Evaluation of the antibacterial synergism of two plant extracts belonging to Bignoniaceae family and development of a topical formulation

Abstract Fridericia caudigera and Cuspidaria convoluta (Bignoniaceae) species, which grow in the northwest of Argentina, have shown antibacterial effect against strains isolated from skin infections, and each one displayed synergism with commercial antibiotics. The aims of this work were to evaluate the antibacterial activity and toxicity of the combination of these two plant species, and to design a stable gel for topical use including the blend of extracts. The combination of extracts was evaluated for synergistic effects (chequerboard assay), genotoxicity (Ames test) and cytotoxicity (Artemia salina test). A gel was subsequently formulated with the combination of extracts using carboxymethylcellulose as a polymer. The following physico- chemical characteristics of the gel formulation: pH, viscosity, spreadability and total phenol content, as well as resistance to severe temperature changes, biological activity (diffusion in agar), in vitro permeation (Franz cells) and primary dermal irritation (Draize test) were analyzed. The combination of extracts showed a synergistic effect on pathogenic bacteria and was not toxic in the in vitro tests. The gel was stable and retained the antimicrobial activity of the original extracts. The formulation proposed in this work could constitute an alternative for primary skin infections since it proved to be safe for topical administration.

Evaluation of the Genotoxicity of Endodontic Materials for Deciduous Teeth Using the Comet Assay

ABSTRACT Objective: To evaluate genotoxicity of zinc oxide, P. A. calcium hydroxide, mineral trioxide aggregate and an iodoform paste using comet assay on human lymphocytes. Material and Methods: Two positive controls were used: methyl-methanesulfonate for the P.A. calcium hydroxide and mineral trioxide aggregate; and doxorubicin for the iodoform paste and zinc oxide. There were also two negative controls: distilled water for the P.A. calcium hydroxide and mineral trioxide aggregate; and DMSO for the iodoform paste and zinc oxide. Comets were identified using fluorescence microscopy and 100 of them were counted on each of the three slides analyzed per drug test. A damage index was established, taking into consideration the score pattern that had previously been determined from the size and intensity of the comet tail. Analysis of variance, followed by Tukey's test, was used to compare the means of the DNA damage indices. Results: The DNA damage index observed for mineral trioxide aggregate (7.08 to 8.58) and P.A. calcium hydroxide (6.50 to 8.33), which were similar to negative control index. On the other hand, damage index for zinc oxide (104.7 to 218.50) and iodoform paste (115.7 to 210.7) were similar to positive control index. Conclusion: Iodoform paste and zinc oxide showed genotoxicity at all concentrations used.

Ortho-nitrobenzyl derivatives as potential anti-schistosomal agents

ABSTRACT In the search for new anti-schistosomal agents, a series of fifteen ortho-nitrobenzyl derivatives was assayed in vitro against both the schistosomulum (somule) and adult forms of Schistosoma mansoni. Compounds 8 and 12 showed significant activity against somules at low micromolar concentrations, but none was active against adults. The SAR demonstrated that the compounds most active against the parasite were mutagenic to the human cell line RKO-AS45-1 only at concentrations 10- to 40-fold higher than the worm-killing dose. Given their electrophilicity, compounds were also screened as inhibitors of the S. mansoni cysteine protease (cathepsin B1) in vitro. Amides 5 and 15 exhibited a modest inhibition activity with values of 55.7 and 50.6 % at 100 µM, respectively. The nitrobenzyl compounds evaluated in this work can be regarded as hits in the search for more active and safe anti-schistosomal agents.

Evaluation of genotoxicity induced by repetitive administration of local anaesthetics: an experimental study in rats / Avaliação da genotoxicidade induzida pela administração repetida de anestésicos locais: um estudo experimental em ratos / Evaluación de la genotoxicidad inducida por la administración repetida de anestésicos locales: un estudio experimental en ratones

BACKGROUND AND OBJECTIVE: Previous studies regarding the effects of some local anaesthetics have suggested that these agents can cause genetic damage. However, they have not been tested for genotoxicity related to repetitive administration. The aim of this study was to evaluate the genotoxic potential of local anaesthetics upon repetitive administration. METHODS: 80 male Wistar rats were divided into: group A - 16 rats intraperitoneally injected with lidocaine hydrochloride 2%; group B - 16 rats IP injected with mepivacaine 2%; group C - 16 rats intraperitoneally injected with articaine 4%; group D - 16 rats IP injected with prilocaine 3% (6.0 mg/kg); group E - 8 rats subcutaneously injected with a single dose of cyclophosphamide; and group F - 8 rats intraperitoneally injected with saline. Eight rats from groups A to D received a single dose of anaesthetic on Day 1 of the experiment; the remaining rats were dosed once a day for 5 days. RESULTS: The median number of micronuclei in the local anaesthetics groups exposed for 1 or 5 days ranged from 0.00 to 1.00, in the cyclophosphamide-exposed group was 10.00, and the negative control group for 1 and 5 days was 1.00 and 0.00, respectively (p < 0.0001). A significant difference in the number of micronuclei was observed between the cyclophosphamide group and all local anaesthetic groups (p = 0.0001), but not between the negative control group and the local anaesthetic groups (p > 0.05). CONCLUSION: No genotoxicity effect was observed upon repetitive exposure to any of the local anaesthetics evaluated. .

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Estudos anteriores sobre os efeitos de alguns anestésicos locais sugeriram que esses agentes podem causar alterações genéticas. No entanto, esses agentes não são testados para genotoxicidade relacionada à administração repetida. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial genotóxico de anestésicos locais após repetidas administrações. MÉTODOS: 80 ratos Wistar machos foram alocados em: grupo A - 16 ratos receberam injeção por via intraperitoneal (IP) de cloridrato de lidocaína a 2%; grupo B - 16 ratos receberam injeção IP com mepivacaína a 2%; grupo C - 16 ratos receberam injeção IP de articaína a 4%; grupo D - 16 ratos receberam injeção IP de prilocaína a 3% (6 mg kg-1); grupo E - oito ratos receberam injeção subcutânea em dose única de ciclofosfamida; grupo F - oito ratos receberam injeção IP com solução salina. Oito ratos dos grupos de A a D receberam uma dose única de anestésico no Dia 1 da experiência; os ratos restantes foram dosados uma vez por dia durante cinco dias. RESULTADOS: A mediana do número de micronúcleos nos grupos com anestésicos locais expostos por um ou cinco dias variou de 0 a 1; no grupo exposto à ciclofosfamida foi de 10 e no grupo controle negativo no primeiro e quinto dias foi de 1 e 0, respectivamente (p < 0,0001). Uma diferença significativa foi observada no número de micronúcleos entre o grupo ciclofosfamida e todos os grupos com anestésicos locais (p = 0,0001), mas não entre o grupo controle negativo e os grupos com anestésicos locais (p > 0,05). CONCLUSÃO: Nenhum efeito de genotoxicidade foi observado após a exposição repetida a qualquer um dos anestésicos locais avaliados. .

JUSTIFICACIÓN Y OBJETIVOS: Estudios previos sobre los efectos de algunos anestésicos locales han mostrado que esos agentes pueden causar alteraciones genéticas. Sin embargo, esos agentes no son testados para la genotoxicidad relacionada con la administración repetida. El objetivo de este estudio fue evaluar el potencial genotóxico de anestésicos locales después de repetidas administraciones. MÉTODOS: 80 ratones Wistar machos se dividieron en: grupo A: 16 ratones que recibieron inyección por vía intraperitoneal (IP) de clorhidrato de lidocaína al 2%; grupo B: 16 ratones a los que se les administró inyección IP con mepivacaína al 2%; grupo C: 16 ratones que recibieron inyección IP de articaína al 4%; grupo D: 16 ratones a los que se les administró inyección IP de prilocaína al 3% (6 mg/kg); grupo E: 8 ratones que recibieron inyección subcutánea en dosis única de ciclofosfamida; grupo F: 8 ratones que recibieron inyección IP con solución salina. Ocho ratones de los grupos A a D recibieron una dosis única de anestésico el primer día de la experiencia; los ratones restantes se dosificaron una vez por día durante 5 días. RESULTADOS: La mediana del número de micronúcleos en los grupos con anestésicos locales expuestos durante uno o 5 días varió de 0 a 1; en el grupo expuesto a la ciclofosfamida fue de 10 y en el grupo control negativo en el primero y quinto día fue de 1 y 0 respectivamente (p < 0,0001). Se observó una diferencia significativa en el número de micronúcleos entre el grupo ciclofosfamida y todos los grupos con anestésicos locales (p = 0,0001), pero no entre el grupo control negativo y los grupos con anestésicos locales (p > 0,05). CONCLUSIÓN: Ningún efecto de genotoxicidad fue observado después de la exposición repetida a cualquiera de los anestésicos locales evaluados. .

Evaluación de riesgo genotóxico: biomonitorización de trabajadores agrícolas de Caranavi, Guanay, Palca y Mecapaca, expuestos a plaguicidas / Assessment of genoptoxic risk biomonitoring of farm workers exposed to pesticides in Caranavi, Guanay, Palca and Mecapaca

OBJETIVO: detectar los efectos citotóxicos y genotóxicos en trabajadores agrícolas, mediante estudios de biomonitoreo genético. DISEÑO: casos y controles Participantes Trabajadores agrícolas de Caranavi, Guanay, Mecapaca y Palca del Departamento de La Paz Lugar Localidades de Caranavi, Guanay, Palca y Mecapaca. Unidad de Genética, toxicológica Instituto de Genética MATERIAL Y MÉTODOS: se aplicó cuestionario a 259 trabajadores agrícolas. Se evaluó el efecto genotóxico en linfocitos de sangre heparinizada, a través de la frecuencia de Intercambios entre Cromátides Hermanas (ICH), el Índice de Proliferación Celular (PRI), el % de células con alta frecuencia de intercambios (%HFC), frecuencia de micronúcleos en células binucleadas (MNBN), el índice de división nuclear (IDN), la presencia de aberraciones cromosómicas estructurales (AC), y parámetros de la prueba del cometa, como DNA de la cola, DNA de la cabeza, longitud de la cola, longitud del cometa, el momento de la cola y momento Olive. RESULTADOS: Los casos presentaron un aumento estadísticamente significativo (p<0.05) en la frecuencia de ICH, MN/BN y aberraciones cromosómicas, en relación a los controles. Así mismo, los parámetros de DNA de la cola, DNA de la cabeza, longitud de la cola, longitud del cometa, el momento de la cola y momento Olive, mostraron un aumento en relación a los controles, (p<0.05). Los valores promedio (± ES) de los parámetros del ensayo del cometa, fueron mayores y estadísticamente significativos en los expuestos y RPP's en relación a los no expuestos. En el grupo de RPP´s se observó daño genotóxico en menor proporción pero no significativo en relación a los expuestos, posiblemente por su capacitación en medidas de protección. El análisis divariado entre exposición a plaguicidas y daño genotóxico mostró que las personas expuestas a plaguicidas tienen 1.49 veces más probabilidad de sufrir daño genotóxico con un OR de 2.49 (IC 95% 1.48 - 4.20). CONCLUSIÓN: los resultados indican que los trabajadores agrícolas expuestos sin protección ni medidas de seguridad a mezclas de plaguicidas, han experimentado riesgo genotóxico, que fue manifestado con elevada frecuencia de intercambios entre cromátides hermanas, micronúcleos, aberraciones cromosómicas y parámetros del cometa, en linfocitos de sangre periférica. Así mismo, la presencia de aberraciones cromosómicas, que son las que determinan la asociación con efecto carcinogénico, muestra que los trabajadores agrícolas expuestos a plaguicidas tienen mayor probabilidad de que las mutaciones encontradas al momento del estudio, puedan volverse irreversibles por la saturación de los sistemas de reparación del DNA y en el futuro desarrollar diversos tipos de cáncer. Estos hallazgos son indicativos de la necesidad de realizar biomonitorización permanente de los agricultores ocupacionalmente expuestos a varias mezclas de plaguicidas, utilizando una batería de pruebas de genotoxicidad. Por otra parte, ilustra la necesidad de implementar pautas generales para minimizar o prevenir la exposición.

OBJECTIVE: to detect the cytotoxic and genotoxic effects in farm workers, by means of genetic biomonitoring studies. Design Cases and controls Participants Farm workers from Caranavi, Guanay, Palca and Mecapaca Place Towns of Caranavi, Guanay, Palca and Mecapaca, Genetic Toxicology unit. Genetic Institute. MATERIAL AND METHODS: Questionnaires to 257 agricultural workers were applied genotoxic effect was evaluated in lymphocytes from heparinized blood, through analysis of sister chromatid Exchange (SCE), cells with a high frecuency of SCE (HFC), proliferation rate index (PRI) the micronucleus (MN) assay, nuclear division index (NDI), chromosomal aberrations (CA) and comet assay parameters like DNA tail, DNA head, tail length comet length, tail moment and Olive moment. RESULTS: the frequency of SCE, MN/BN and CA was significantly increased (p<0.05) in cases vs. control group. Likewise, the parameters of Tail DNA, DNA head , tail length, comet length, tail moment and Olive moment, showed increased values in relation to controls (p<0.05). Averages of comet parameters were significantly higher in exposed and RPP's group than in un exposed group. RPP`s groups showed minor DNA damage but not as significant as exposed group, possibly due to their training in protective measures. The bivariated analysis between pesticides exposure and genotoxic damage showed that the people exposed to pesticides have 1.49 times more probability of suffering genotoxic damage with OR 2.49 (IC 95% 1.48 - 4.20). CONCLUSIONS: the results indicate that the farm workers exposed to mixture of pesticides without protection and safety measures, are at genotoxic risk hazard , with high frequency of sister chromatid exchange, micronuclei, chromosomal aberrations and parameters of the comet assay in lymphocytes of peripheral blood. Also, the presence of chromosomal aberrations, which are those that determine the association with carcinogenic effect, shows that the farm workers exposed to pesticides have greater probability that the mutations found at the time of the study, can become irreversible by saturation of the DNA repair systems and in the future develop diverse types of cancer. These findings are indicative of the necessity to do permanent biomonitoring of the farmers occupationally exposed to several mixtures of pesticides, using a battery of genotoxicity tests. On the other hand, it illustrates the necessity to implement general guidelines to diminish or to prevent the exposure.

Averiguación de la acción mutagénica de la hoja de coca y derivados en consumidores rutinarios / Action mutagenic...

Se analiza si el consumo de la hoja de coca, así como la pasta básica de cocaína ocasiona daño en el material genético en los individuos consumidores. Para el estudio se seleccionaron dos grupos: uno conformado por consumidores de hojas de coca (HC) procedentes de Puno, San Pedro de Casta, Huancayo y Huánuco. El segundo grupo conformado por consumidores de pasta básica de cocaína (PBC) que están recibiendo tratamiento ambulatorio en los hospitales Víctor Larco Herrera y Hermilio Valdizán. En el primer grupo (HC), el número de individuos analizados es muy pequeño y que por encontrarse en provincias, los resultados son muy relativos y de difícil interpretación y que el hábito de chacchar confiere los consumidores una capacidad antimutagénica. En el grupo de consumidores de PBC los resultados indican una mayor ocurrencia de mutaciones cromosómicas, pero recordando que los consumidores de PBC también consumen otros productos que podrían ser resonsables de tales mutaciones o cambios